NY∕T 3074-2017 牛流行热诊断技术(农业)
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ID： |
DEAB5C93643544AEA26325475856075D |
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文件大小(MB)： |
0.77 |
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页数： |
14 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-25 |
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ICS 11.220,B 41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3074一2017,牛流行热诊断技术,Diagnostic techniques for bovine ephemeral fever,2017 - 06-12 发布2017 - 10 一01 实施,中华人民共和国农业部发布,刚昌,本标准按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,本标准由农业部兽医局提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会CSAC/ TC 18 1)归口,本标准起草单位:中国农业科学院兰州兽医研究所,本标准主要起草人: 郑福英、殷宏、刘永生、宫晓炜、陈启伟、高闪电,NY/T 3074-2017,I,NY/T 3074-2017,引,本文件的发布机构提请注意， 声明符合本文件时，可能涉及附录B 与《牛流行热病毒间接ELISA 抗,体检测试剂盒及其制备方法》相关的专利的使用,本文件的发布机构对于该专利的真实性,该专利持有人已向本文件的,就专利授权许可进行谈判,联系方式获得:,专利持有人姓名:,地址:甘肃省兰,请注意除,利的责任,按NY/ T,体进行定性和,不能进行定,应用,H,立场,合理且元歧视的条款和条件下,相关信息可以通过以下,热病毒血清抗,~ ，而,技术可同时,牛流行热诊断技术,1 范围,本标准规定了牛流行热的临床诊断和实验室诊断的技术要求,本标准适用于牛流行热的诊断,2 规范性引用文件,NY/T 3074-2017,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB 19489 实验室生物安全通用要求,NY/ T 543- 2002 牛流行热微量中和试验方法,3 生物安全措施,进行牛流行热实验室诊断时，如病毒分离、血清处理等，按照GB 19489 的规定执行,4 临床诊断,4. 1 流行特点,4. 1. 1 以3 岁~5 岁壮年牛多发，奶牛、黄牛易感性最强,4. 1.2 通过媒介昆虫叮咬呈病毒血症的病牛，再叮咬易感牛传播扩散，多发生于夏末秋初蚊虫活跃的,多雨季节,4. 1.3 呈跳跃式传播，疫区与疫区之间交叉存在无病的清洁区,4. 1.4 有一定的周期性，间隔时间为1 年~7 年不等,4. 1.5 发病率高、死亡率低，在没有继发感染的情况下病牛多为良性经过,4. 2 临床症状,4.2. 1 病牛表现为突发高热，体温高达39 . 50C~42 . 5 0C ，持续2 d~3 d ,4. 2. 2 病牛流泪、畏光，眼结膜充血;有鼻炎性分泌物;口腔发炎、流涎;呼吸急促、困难,4. 2. 3 高热期病牛食欲废绝，反色停止，瘤胃服胀、蠕动停止，便秘或腹泻,4. 2. 4 娃振母牛可发生流产、死胎,4. 2. 5 乳牛的产乳量明显降低，甚至停止,4.3 剖检病变,4. 3. 1 主要病变在肺部，急性死亡的病例可见有明显的肺间质气肿，有些病例可见肺充血与水肿,4. 3. 2 淋巴结充血、肿胀;真胃、小肠和盲肠呈卡他性炎症和渗出性出血,4. 4 结果判定,符合4. 1 流行特点，病牛出现4. 2 临床症状和4. 3 剖检病变，判为疑似牛流行热,5 实验室诊断,5. 1 样品采集与储存,5. 1. 1 样品的采集,NY/T 3074-2017,选择处于发热期(体温39 . 5.C~42 . 5.C) 的活畜采集样品，从其颈静脉无菌采集2 管肝素抗凝血,每管5 mL~6 mL; 另外，再采集5 mL~6 mL 血液收集到血清管中，用于分离血清,5. 1.2 样晶的储存,5. 1. 2. 1 样品采集后，置于冰上冷藏送至实验室,5. 1. 2.2 2 管肝素抗凝血， 1 管置于4.C 冷藏，另外1 管冻存于一80.C ,5. 1. 2.3 将血清管稍倾斜放于37.C 温箱内，保温2 h ; 然后， 3000 r/ min 离心10 min o 吸取血清，转移,到另外的无菌1. 5 mL 离心管中，冻存于一20.C ,5. 2 器械与设备,组织破碎仪、低翩翩心伊~…阳、全自动凝胶成像系统、恒温培,养箱、洗瓶或者洗板机、,5. 3 牛流行热病毒分,50μL 容量的,A.l)、牛白细,5 . 3. 2 样,5. 3. 3. 1,接种1 日,即可,5. 3. 3. 1.2,5. 3. 3. 1. 3,- 80.C 。接种,5. 3. 3. 2 传代,5. 3. 3. 2. 1 用,颅骨,5. 3. 3. 2. 2 用另一,管中，在天平上称,离心10 min ，取上清再接种乳鼠,5. 3. 4 观察结果,mL 容量的灭菌离心,第1 代接种乳鼠在接种后10 d~12 d 死亡，死前元明显症状。第2 代接种乳鼠在接种后5 d~7 d,死亡，死亡前表现后腿麻痹，常倒向一侧。从第3 代开始，接种乳鼠在接种后3 d~5 d 有规律地集中死,亡，死前主要表现为神经症状，颤抖，后腿麻痹，步态不稳，常倒向一侧，皮肤痊孪性收缩，多数经1d~,2d死亡,5. 3. 5 病毒鉴定,将盲传至3 代~5 代的乳鼠脑组织， 按照5.3.3 . 2 的步骤处理，取上清，参照5 . 4 做进一步鉴定,5. 3. 6 结果判定,接种乳鼠出现临床神经症状，并且参照5 . 4 鉴定结果阳性，判定为牛流行热病毒分离阳'性;否则，判,2,定为牛流行热病毒分离阴性,5.4 RT- PCR 方法,5. 4. 1 试验材料,NY/T 3074-2017,去离子水、DEPC 水、病毒RNA 提取试剂盒、一步法RT - PCR 试剂盒、DL……
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